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PCR實驗室設(shè)計基本要求

發(fā)布時間2020-01-28 08:53:12人氣:23979

PCR實驗室設(shè)計基本要求 
1  PCR 實驗室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增、產(chǎn)物分析等三或四個區(qū)域。只是使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室,有上述前面三個區(qū)域即可。各區(qū)域應(yīng)完全獨(dú)立分隔,不應(yīng)有任何的空氣直通。 
2標(biāo)準(zhǔn)的PCR實驗室產(chǎn)物分析區(qū)或三個區(qū)域的最后一個區(qū)域(即擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)),空氣流向應(yīng)由室外向室內(nèi),可通過在室內(nèi)設(shè)置通風(fēng)櫥、排風(fēng)扇或其他排風(fēng)系統(tǒng)達(dá)到空氣流由室外向室內(nèi)流動的要求。

PCR實驗室根據(jù)使用儀器的功能合理設(shè)置各個工作區(qū)域,如采用聚合酶聯(lián)反應(yīng):則設(shè)置試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨(dú)的工作區(qū)域,這是最常用的分區(qū)方式。樣品需要粉碎處理的,還需增設(shè)樣品粉碎區(qū);若使用實時熒光PCR法:基因擴(kuò)增區(qū)、基因產(chǎn)物分析區(qū)可以合并在一個房間內(nèi);采用標(biāo)本處理、核酸提取及擴(kuò)增檢測為一體的全自動化PCR分析儀,則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并為一個區(qū)域,因此PCR實驗室原則上設(shè)置五個區(qū)或四個區(qū)或三個區(qū)或二個單獨(dú)的工作區(qū)。
核酸擴(kuò)增前區(qū)和核酸擴(kuò)增后區(qū)可設(shè)在一個房間內(nèi),但必須在滿足下列要求的前提下:

a.核酸擴(kuò)增前區(qū)實驗室內(nèi)設(shè)置兩個不同位置的實驗區(qū),試劑配置在超凈工作臺中操作,樣品處理在生物安全柜內(nèi)操作。

b.在核酸擴(kuò)增后區(qū)使用全封閉的擴(kuò)增和檢測系統(tǒng),如實時熒光PCR儀等。

c.每個實驗人員使用各自的試劑、耗材、移液器和盛放污染物的盛器。

d.在實驗前后對操作區(qū)域和共享器具進(jìn)行清潔及消毒。
e.各區(qū)域的試劑、器具、儀器和設(shè)備為該區(qū)專用,不得交叉使用。

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